赛制方面：分为常规赛和季后赛，赛季时间通常为每年4月到10月，2000年职棒赛季有几场常规赛移到美国本土之外的日本进行，这是职棒大联盟为了开拓职业棒球已经相当发达的日本市场，同时也开辟潜力很大的亚洲市场，期间，大联盟球队除了进行本身的常规赛，还同日本全明星队打了表演赛，取得了巨大的商业成功。　　

一、常规赛：一般情况下，30支球队每队每个赛季要进行162场常规赛。1997年前，国家联盟和美国联盟的球队互相不进行交锋，1997年后，这一状况得到改善，联盟之间开始了“跨联盟比赛”，每队每个常规赛季均有15场跨联盟比赛。而其中最令人注目的是“三大德比（同城）大战”：1，“风城大战”，同处“风城”芝加哥的小熊和白袜对阵； 2，“湾区大战”，同在加州湾区的奥克兰运动家和旧金山巨人交锋；3，“地铁大战”，纽约的两支子弟兵同室操戈。　　常规赛季如遇两队在打完162场比赛后战绩持平，必须进行1场附加赛，一决高下，因此可能出现1支球队常规赛季比赛达到163场的现象。那么，有没有可能打不足162场比赛呢？回答是肯定的，1994年，因为球员要求增加工资而发生的劳资矛盾，导致球员罢工，当时被称为“百万富翁同亿万富翁的斗争”，当年赛季仅完成三分之二。　　

二、季后赛：　　1、 赛区系列赛（季后赛第一轮）（DivisionSeries）：两个联盟各产生4支球队，其方式是：根据162场常规赛的战绩，联盟下的3个赛区的冠军直接进入赛区系列赛，第4支球队持“外卡”（WildCard）参赛，而此支球队是联盟成绩最好的赛区第2名，所以，经常出现这样的情况：持“外卡”球队有时比赛区冠军的战绩要好。四支球队两两捉队厮杀，联盟中战绩最佳的球队对阵第四名球队，第二名应战第三名，采取五战三胜制，产生两支胜队。　　2、 联盟冠军系列赛（联盟冠军战）（ChampionshipSeries），第一轮的两支胜队进行七战四胜的联盟冠军争夺战，胜方是联盟的冠军（有点类似NBA的东西部联盟的联盟冠军）。　　3、 世界系列赛（世界大赛）（WorldSeries），美国联盟和国家联盟的联盟冠军进行七场四胜的总决战（类似NBA的总决赛），冠军便加冕为美国职棒大联盟的最终冠军。